细胞增殖及活性检测服务

检测细胞存活及增殖的方法主要有两种，一种是检测DNA的合成量（BrdU、EdU检测法），一种是检测细胞的代谢产物含量（MTT、CCK8、XTT检测法）。客户可根据处理药物的种类和数量等因素选择合适的检测方法。

1、BrdU法

BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）是胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期、S期活体注射或细胞培养加入，然后利用抗BrdU单克隆抗体ICC染色显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物双重染色可判断增殖细胞的种类，增殖速度，对研究细胞动力学有重要意义。

2、EdU法

EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中。通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性。适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。

3、MTT法

活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其吸光度值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于生物活性因子的活性检测、抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济、快捷。

4、XTT法

XTT作为线粒体脱氢酶的作用底物，被活细胞还原成水溶性的橙黄色甲臜产物。当XTT与电子耦合剂（例如PMS）联合应用时，其所产生的水溶性的甲臜产物的吸光度与活细胞的数量成正比。XTT可以被活细胞中的代谢酶还原成黄色水溶性的代谢产物，在OD450处有吸收峰。它的特点是操作简便、灵敏度高、重复好。

5、CCK8法

WST-8是一种类似于MTT的化合物，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析，常用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定和肿瘤药敏试验。它的特点是操作更简便，试剂更加稳定、容易保存和使用，且对细胞的影响更小。